超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法用于抗体中唾液酸的测定

建立了岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用测定抗体中唾液酸N-乙酰神经氨酸（Neu5Ac）和N-羟乙酰神经氨酸（Neu5Gc）含量的分析方法。利用三氟乙酸水解释放出抗体中的唾液酸，以Inertsil Amide酰胺基色谱柱对唾液酸进行保留和分离，采用LCMS-8060在ESI负离子模式下7 min内完成定量分析。本文考察了方法的选择性、线性关系、重复性与准确度及残留，结果表明：空白溶剂及内标化合物对唾液酸定量分析无明显影响；Neu5Ac与Neu5Gc分别在0.02～20 μmol/L和0.008～8 μmol/L浓度范围内线性关系良好，线性相关系数均大于0.999，准确度范围分别在93.4%~111.6%和96.7%~102.8%之间；低中高三个不同浓度的质控品平行测定6次，Neu5Ac和Neu5Gc测定结果的RSD分别为1.45%~2.91%%和0.78%~5.35%，结果均值的准确度分别为86.5%~94.9%和91.7%~101.8%，重复性和准确度良好；空白样品无明显残留，不影响样品中唾液酸的定量测定。该方法具有前处理简单、分析快速、选择性强、重复性好和灵敏度高的特点，可用于抗体类药物中唾液酸含量的分析。