副标题: 
荧光分光光度计

R5/Q1. 注意事项

R4/A1. 氙灯使用时间一般推荐不超过500小时,最大不能超过1000小时,如果超过了1000小时会有可能爆炸而损坏灯座。

R3/Q1. 什么是激发光谱,什么是发射光谱?

R3/A1. 激发光谱:改变激发波长,测量在最强荧光发射波长处的强度变化,以激发波长对荧光强度作图可得到激发光谱。激发光谱形状与吸收光谱形状完全相似,经校正后二者完全相同!这是因为分子吸收光能的过程就是分子的激发过程。激发光谱可用于鉴别荧光物质;在定量时,用于选择最适宜的激发波长。
发射光谱:发射光谱也叫荧光光谱。一定波长和强度的激发波长辐照荧光物质,产生不同波长的强度的荧光,以荧光强度对其波长作图可得荧光发射光谱。发射光谱形状与激发波长无关,发射光谱与吸收光谱镜像对称,激发光谱形状与吸收光谱几乎一样。

R3/Q3. 从激发光谱可以得到哪些信息?

R3/A3. 从激发光谱可以得到化合物吸收波长、溶剂吸收波长、吸收强度等信息。

R3/Q4. 为什么我测的样品放在样品仓测量时荧光强度会逐渐下降,如何处理?

R3/A4. 有些样品在光照及空气的氧化作用下会发生化学反应,从而使得荧光强度慢慢发生变化,这跟样品性质有关系,对于这种情况,样品处理完后应尽快测试,同时可以在软件中设定,当不采集数据时,把仪器光路中的shutter关闭,避免光长时间照射样品,RFPC软件具体设定方法:点击菜单栏中“Configure”→“Instrument”弹出“Instrument Parameter”对话框,把Auto shutter设定为on状态即可。
LabSolutions RF 设置方法:点击菜单栏中“仪器”---“仪器设置”---“维护”—“自动快门”选择“on”即可。

R2/Q1. 如何检查仪器的信噪比?

R2/A1. RF-5301仪器:点击菜单栏中“Configure”→“Instrument”弹出“Instrument Parameter”对话框,点击“S/N Ratio Check”旁边的“Perform”,弹出S/N比检查对话框,把装好蒸馏水的石英池放到池架中,点击OK开始测定水的拉曼峰高,新仪器测得的S/N值应大于150,随着灯能量降低,光路老化S/N会下降。

RF-6000仪器:打开软件----管理----认证----勾选“灵敏度检测”---把装好蒸馏水的石英池放到池架中,点击OK开始测定水的拉曼峰高,新仪器测得的S/N值应大于1000(RMS),请参考下图。

R2/Q2. S/N比下降是什么原因?

R2/A2. 氙灯不稳定或老化了;仪器光路老化了;超纯水污染了; 氙灯预热时间不够;电压不稳定,需要加稳压器。

R2/Q3. 氙灯使用寿命有多长,如果氙灯老化了会有什么现象?

R2/A3. 氙灯一般可以使用500小时,如果氙灯老化了,氙发光时会有轻微的闪烁,光强度不稳定,测量数据也会变得不稳定,同时S/N会降低。

R2/Q4. 普通的荧光比色皿和无荧光比色皿有什么区别?

R2/A4. 普通的荧光比色皿由石英材料制成在260nm附近会有微弱吸收,在400nm附近会产生微弱的荧光,所以当测量的样品需要在260nm附近激发时建议使用无荧光比色皿,这种比色皿由特殊石英材料制成,基本不会发出荧光。

R1/Q1. 如何查看氙灯的点灯时间?

R1/A1. RFPC软件:点击菜单栏中“Configure”→“Instrument”弹出“Instrument Parameter”对话框,在“lamp Time Used”里面可以看到点灯时间。
LabSolutions RF软件:点击菜单栏中“仪器”—“仪器设置”—“光源状态”即可查看。

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