高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定肝细胞和Hank's缓冲液中d-Penicillamine2,5-enkephalin的浓度

本文建立了一种使用岛津高效液相色谱仪LC-20A和三重四极杆质谱仪MS-8030联用测定肝细胞和Hank’s缓冲液中d-Penicillamine 2,5-enkephalin（以下简称DPDPE）的浓度，以此研究DPDPE作为底物用于“三明治”培养大鼠原代肝细胞的转运体功能。在Hank’s缓冲液中线性范围为0.5~50 ng/well（r2=0.9995），定量限0.5 ng/well；在细胞基质中线性范围为0.1~5 ng/well（r2=0.9997），定量限0.1 ng/well。方法日内和日间精密度（RSD）均小于15%。肝细胞和Hank’s缓冲液中DPDPE的提取回收率均大于65%。使用所开发的分析方法对肝细胞和Hank’s缓冲液中DPDPE浓度进行分析，结果表明α-萘异硫氰酸酯可以抑制在“三明治”培养大鼠肝细胞胆管侧的外排及基底侧的摄取，对基底侧外排无显著影响。