检测方法 | 2020版《中国药典》2322通则应对-动物类中药形态汞测定

　　《中国药典》2020年版中，通则《2322 汞、砷元素形态及其价态测定法》得到了升级。该通则中砷和汞的形态检验方法为专属性强、鉴别力好、成熟度高的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法（HPLC-ICPMS）。

　　地龙（别名蚯蚓）是我国重要的中药材之一，地龙对土壤中的重金属元素具有较强的吸附和富集能力。汞是自然界中常见有毒致癌性元素之一，汞的生物毒性不仅与其含量有关，还与其存在形态有关。常见的汞化合物中，甲基汞等有机汞脂溶性高，容易被生物体所吸收，生物危害突出，毒性大小一般为甲基汞（MeHg）＞乙基汞（EtHg）＞无机汞（iHg）。为了准确表征地龙中汞的人体暴露水平，需要对汞的不同形态进行准确测定。

应对利器：

图1 HPLC-20Ai+ICPMS-2030联用系统

前处理：

色谱条件：

分析结果：

　　取市售地龙药材，按照前处理方法处理后进HPLC-ICP-MS分析，并对样品进行1 μg/L加标回收试验。5 μg/L标准溶液的色谱图见图2，样品分析结果见表1，地龙中汞主要以无机汞形式存在，甲机汞和乙基汞未检出，3种形态汞的加标回收率为82.0~91.5%。

图2 无机汞、甲基汞和乙基汞谱图

表1 样品形态汞测试结果

注意事项：

◆ C18柱的填充物通常为硅胶材质，需控制流动相的pH值，太高的pH值会使硅胶溶解，C18柱使用的pH值通常为2~8，特殊材质的C18柱pH值可以为1-10。

◆ 用50%氨水调pH值时，因其碱性较强，需将氨水的浓度调低至5%左右，在pH值=7左右，少量滴加。

◆ ICP-MS的检测与化合物的结构无关，理论上等度洗脱程序、等浓度三种形态汞（以Hg计）的峰面积应该大致相同，若峰面积差异较大，需要排查标准溶液配制是否正确、测样过程中Hg形态是否发生变化、无机汞拖尾是否严重、柱效改变等。

◆ 由于流动相采用8%的甲醇，长期高有机负载会影响ICP-MS分析信号的稳定性，同时甲醇可能碳化导致锥孔堵塞，影响分析灵敏度。可以降低雾室温度为0℃，减少进入ICP中的甲醇蒸气。