本文利用岛津高效液相色谱仪，建立了一种维生素K1原料药中维生素K1顺式异构体含量的正相高效液相色谱法。本方法参照《中国药典(2020年版)》中维生素K1的含量测定方法，使用硅胶柱为分离色谱柱，体积比2000:1.5的石油醚（沸程60 ℃~90 ℃）正戊醇为流动相，等度洗脱，用紫外检测器在254 nm处进行检测，按内标法以顺、反式异构体峰面积的和计算维生素K1含量；按峰面积归一化法计算维生素K1顺式异构体含量。该分析方法操作简单，重复性好，满足相关标准的要求，可用于维生素K1原料药中维生素K1及顺式异构体含量的检测。