本文建立了一种使用离子对反相超高效液相色谱法（IPRP-UHPLC）在非变性条件下分析siRNA双链核酸含量的分析方法。探索了梯度条件、柱温、进样体积对分析的影响。优选的分析条件下，siRNA双链及其单链杂质AS和SS峰形良好，分离度大于2；连续六次进样，siRNA双链及其单链杂质AS和SS的保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）在0.06~0.12 %和0.50~1.17 %之间，重复性良好；双链峰面积百分比为99.523%，单链杂质AS和SS峰面积百分比分别为0.247%和0.230%。方法分离度好、重复性佳，可在非变性条件下分析siRNA双链含量。