L3/Q32. 如何使用GPC测试肝素钠的分子量与分子量分布

L3/A32. 欧洲药典（EP）7.0版使用低分子量肝素钠(数均分子量3800)的宽分布对照品，只用1根色谱柱，样品、盐和溶剂峰难以基线分离。欧洲药典（EP）7.0根据紫外和示差色谱图的峰面积计算对照品色谱图中每个时间点的分子量，通过对保留时间与每个时间点分子量的3次多项式拟合，得到校正曲线。其计算方法没有涉及具体细节，例如怎样确定紫外和示差检测器串联的时间差，制作标准曲线中分子量选取的范围及选取方式等，选择的差异均可影响测试结果。2015版中国药典虽然也选取了宽分布对照品，但对照品说明书提供了宽分布标准品，可通过标样表中的累计面积值找到对应的保留时间，再用标样表中的分子量与保留时间建立校准曲线，且只需使用示差检测器，方法简单，减少误差。