参考《粮谷中硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的测定 液相色谱-电感耦合等离子体质谱法》标准，建立了一种测定粮谷中硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸含量的高效液相色谱电感耦合等离子体质谱法（HPLC-ICPMS）。样品经过处理后，采用高效液相色LC-20Ai对硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸进行分离，电感耦合等离子体质谱ICPMS-2030系列检测进行定量分析。结果表明硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸与其他硒代氨基酸及亚硒酸盐和硒酸盐分离度良好，线性范围在0.1~10.0 ng/mL范围内回归系数大于0.9999，准确度98.83~100.58%，保留时间重现性RSD%低于0.57%，浓度重现性RSD%低于2.56%，回收率90.87%~99.40%，方法定量限分别为硒代半胱氨酸2.3 μg/kg，硒代蛋氨酸1.2 μg/kg，低于标准定量限要求，适用于粮谷中硒代半胱氨酸和硒代蛋氨酸的含量分析。