本文参考YY/T 1453-2016《组织工程医疗器械产品Ⅰ型胶原蛋白表征方法》的相关条件和要求，采用岛津氨基酸分析仪LC-16AAA建立了一种自动柱后衍生高效液相色谱法测定胶原蛋白中羟脯氨酸含量的分析方法。实验结果表明：羟脯氨酸在5~100 µg/mL浓度范围内，线性相关系数大于0.999，准确度在98.9~101.2%之间。精密度实验中，10 µg/mL 标准溶液保留时间RSD%值为0.15%，峰面积RSD%值为0.77% 。该方法中茚三酮柱后衍生和样品测定为全自动完成，线性佳，分离效果好，可为胶原蛋白中羟脯氨酸的测定提供参考。