解决方案-遗传毒性杂质检测

2020年版《中国药典》已收载9306遗传毒性杂质控制指导原则，并于2020年12月30日正式实施，内容分为四部分：总则、危害评估方法、可接受摄入量的计算方法、限值制定计算方法。

2025年版进一步修订完善该指导原则。修订情况如下：

● 修订了上市后药物评价的要求：已上市药品中杂质一般在以下情形下需要进行评估①由于生产工艺变更导致产生了新杂质或提高了已有杂质水平；②变更了适应症或给药方案，显著影响了可接受的致癌风险水平；③原有杂质获得了新的危害性数据（分为1类或2类）等。

● 修订了例1、例2中的计算错误：0.0959mg/（kg·d）÷50000×50kg=0.0959μg（例1），0.131mg/d÷300mg/d×100%=0.044%（例2）。

● 增加了药品生产、药品标准提高及上市药品再评价过程中“对于实际存在和可能出现的杂质的要求，在结构已知的情况下”的描述内容。

● 完善了单个杂质、根据给药周期调整的TTC适用条件的描述等内容。

此外，目前化学药各论收载【生产要求】/【检查】相关要求汇总如下，供参考。

 

岛津为药检机构、制药企业、研发机构、CRO/CDMO等提供完善的遗传毒性杂质检测方案，不限于沙坦类药物、替丁类药物、二甲双胍、磺酸盐类药物等。特别是针对当前业内热点关注的NDSRIs的分析方法建立与检测，岛津应用团队携全系列质谱产品（含高分辨质谱）可全程为制药客户提供技术及服务支持。

替丁类药物中NDMA检测（LC-MS/MS法）

药品中叠氮类遗传毒性杂质检测（二维离子色谱法）

叠氮化物是药品合成中常用的物质之一，与亚硝基杂质相比，叠氮杂质具有更高的毒性。体外研究显示叠氮化物有抑制相关生物酶、阻断体内氧气及血红蛋白的形成，以及黏膜刺激性、中枢神经损伤等毒性。因此，在药物生产和质量控制过程中应严格对叠氮化物杂质含量进行检测。目前《中国药典》厄贝沙坦原料药中叠氮化物含量采用离子色谱法进行检测，通过阀切换基体消除法对供试品溶液进样后进行在线处理。岛津的二维离子分析系统IC-16可以满足分析需求。

全球备受关注的NDSRIs

自2018年7月“缬沙坦紧急召回事件”以来，小分子亚硝胺类杂质的致癌性和致突变性已得到充分的研究，但那些药物本身能通过亚硝化试剂形成亚硝胺类杂质的研究相对较少。欧洲药品管理局（EMA）和美国食品药品监督管理局（FDA）为解决这一问题，分别于2023年-2024年期间先后出台/更新了行业指南和要求来指导评估NDSRIs。

● 2023年8月4日，FDA发布了关于《亚硝胺原料药相关杂质（NDSRI）推荐可接受摄入量限量》的最终指南（RAIL指南），该指南根据预测的致癌效力分类为NDSRI的AI限值提供了建议。

● 2024年9月4日，FDA发布了关于《控制人用药物中亚硝胺杂质》的最终指南（2024年9月，第2版）。该指南描述了小分子亚硝胺和NDSRI，向行业提供控制亚硝胺的缓解策略及其实施建议。

NDSRIs（Nitrosamine drug substance-related impurities）是一类与原料药有着类似结构单元的亚硝胺类杂质，通常来源于亚硝化的具有仲胺或叔胺的API（或API片段），这些API在暴露于亚硝化剂（如辅料以及水中残留的亚硝酸盐）时发生亚硝化反应而形成。因此NDSRI杂质结构与API（活性药物成分）结构相似。鉴于每个API结构的独特性，且通常缺乏致癌性和致突变性研究数据，因此，确定其在药品中的可接受水平极具挑战。NDSRI的研究本身极具挑战，且目前缺乏有意义的参考诱变剂来充分反映它们的分子大小和复杂性，如果ADI过于严苛，而常用的分析方法达不到如此高的要求，就无法准确定量和控制NDSRI，监管需兼顾安全性和可操作性，以确保患者的安全，同时也要确保相关药物不会因为不合理的NDSRI限值设定而出现供应短缺的问题。当然，面对复杂的实际分析需求，分析方法与检测标准不断升级和探索也是必然的，检测技术从传统的GC-MS扩展到LC-MS/MS和LC-HRMS以建立合适的特异性和高灵敏度分析方法来对应非挥发性NDSRIs的挑战，国内监管机构及制药客户逐步建立高灵敏度检测能力，以应对行业的实际分析要求。

FDA目前已发布280多个品种的涉及某些假设的NDSRI以及其他已鉴定的亚硝胺杂质的推荐AI限值（截止到2025年4月30日），有14类药物推荐了相关检测方法，包括（顶空进样/直接进样）GCMS、LC-HRMS、LC-ESI-HRMS等。EMA也发布了190多个品种的相关数据（截止到2025年2月）。岛津针对普萘洛尔、依那普利、磷酸西列格汀、酒石酸伐尼克兰、托莫西汀、布美他尼等均有应用解决方案，如有需要可在岛津官网搜索了解或联系官方客服人员。

N-亚硝胺普萘洛尔杂质的LC-MS/MS分析

N-亚硝胺布美他尼杂质的Q-TOF分析

● 采用共同注入功能，可以有效消除溶剂效应对色谱分离的影响。如上左图。

● 使用离子累积功能时，可以通过在Q2碰撞池内积累离子，使离子释放与正交加速单元的离子射出同步，从而提高离子的使用效率。如上右图，使用离子累积技术时，可以大幅度提高目标物的响应(提升约20倍)，有利于定量分析。如上右图。

利用岛津的LCMS-9050四极杆飞行时间液质联用仪，建立了对布美他尼中N-亚硝基布美他尼的测定方法。使用SIM模式采集，外标法定量分析。N-亚硝基布美他尼在1.0-20.0ng/mL浓度范围内相关系数大于0.999，精确度在94.2%-105.2%；加标回收实验中，考察了2个不同浓度水平，回收率为91.59-104.71%；重复性实验中，对不同浓度的标准溶液重复进样6次，其保留时间RSD为0.08-0.16%，面积RSD为0.89-2.94%，仪器精密度良好。该方法能满足FDA发布的对于布美他尼药物产品中的亚硝胺类杂质N-亚硝基布美他尼的检测。

相关耗材推荐及应用文集搜索

 

• 
  化学药NMDA检测方案
• 
  遗传毒性杂质整体解决方案

如有需要，请联系岛津获取以上样本资料。