解决方案-0514 分子排阻色谱法修订

概述

分子排阻色谱法（Size Exclusion Chromatography, SEC）是生物大分子（如蛋白质、多肽、核酸及多糖）、高聚物分子分离分析的重要技术，其原理基于分子尺寸差异进行分离。2025年版《中国药典》对通则0514的修订，旨在与国际标准（如ICH、USP）协调，强化对生物制品、复杂制剂的质量控制要求。

● 修订说明：

1) 对概述中的部分描述进行修订。

2) 在“1. 对仪器的一般要求”项下，补充分子排阻色谱法所需仪器组成的表述，增加常用检测器表述。在“2.系统适用性试验”部分以峰谷比p/v替换原有分离度的表述。

3) “测定法”项下“生物大分子聚合物分子量与分子量分布的测定法”修订为“凝胶渗透色谱（GPC）测定法”。

4) “测定法”项下增加“（3）分子排阻色谱-静态光散射（SEC-SLS）测定法”内容。

修订方向	2020年版中国药典	2025年版中国药典
定义	其余分子则按分子大小依次被洗脱	增加机理描述：其余分子则按分子大小进人不同的孔径内，分子越小，进入孔的数量越多，滞留时间越长；反之，分子越大，滞留时间越短，从而使分子按其大小被依次洗脱。
仪器要求	仅提及：分子排阻色谱法所需的进样器和检测器同高效液相色谱法 (通则 0512)	仪器由输液泵、进样器、柱温箱(色谱柱)、检测器和数据处理系统等组成。进样器和柱温箱同高效液相色谱法(通则0512). 补充常用检测器类型：紫外-可见分光检测器、示差折光检测器、蒸发光散射检测器与静态光散射检测器等。
流动相	流动相中可加入适量的有机溶剂，但不宜过浓，一般不应超过 30%	不限制有机相浓度，列举常用有机相：有机相通常为四氢呋喃和 N,N-二甲基甲酰胺等
系统适用性试验	分离度计算沿用HPLC通则（通则0512），要求分离度＞2.0。	引入峰谷比替代分离度：在高分子杂质检查时，若某些药物分子的单体与其二聚体不能达到基线分离，采用峰谷比表示分离程度，除另有规定外，峰谷比应大于2.0。
测定法	分三类：分子量测定（蛋白质/多肽）、生物大分子聚合物分子量及分子量分布、高分子杂质测定。	新增：分子排阻色谱-静态光散射（SEC-SLS）测定法测定绝对分子量和分子量分布信息，详述原理、计算方式及操作步骤等。