副标题: 
紫外可见分光光度计

U3/Q12. 测试总氮的时空白值很高。

U3/A12. 可能水的纯度不够?比色皿脏?玻璃器皿脏?试剂纯度不够?

U3/Q11. 测样品吸光值一直变大。

U3/A11. 建议用户用水调零后观察吸光值的变化,再用丙酮水溶液在260nm处观察吸光值是否变化很大,如果两种都稳定那就可以判断是样品不稳定导致

U3/Q10. 紫外测试甲醇溶液,200-210nm噪声大。

U3/A10. 可能是由于甲醇纯度不够,导致在该波长范围内有较强的紫外吸收,建议 更换纯度更高的甲醇溶剂进行测量。

U3/Q9. UV-3600和积分球测试反射率时样品在1900-2600nm范围有向上有峰

U3/A9. 这个问题是一个普遍的问题,是积分球白板硫酸钡吸收所致,由于硫酸钡吸收了水分,然后再用它做参比,测试出来的样品反射率会偏高,可以偿试使用纯度更高或者更加干燥的硫酸钡重新压制硫酸钡白板可以解决该问题,同时,注意硫酸钡白板的干燥性。

U3/Q8. 为什么样品测试读数跳动较大?

U3/A8. 首先空气做基线,再把基线扫出来,如果不稳定,需要确认在紫外区还是可见区不稳定,如果是紫外区不稳定更换氘灯,如果可见区不稳定,更换钨灯;如果稳定,确认比色皿是不是干净,用纯水做基线,扫描纯水谱图,基线是稳定的,说明比色皿没有问题,可能是样品不稳定的问题,建议其按照方法中规定的时间及时测试,或者现配现用。

U3/Q7. 狭缝大小对测试结果有什么样的影响?如何选择合适的狭缝?

U3/A7. 狭缝越小,分辨率越高,峰形越尖锐,测试灵敏度越高,但狭缝过小,读数不稳定,噪音增加
狭缝越大,入射强度越大,噪音小,读数稳定,但狭缝过大,分辨率降低,干扰增大
狭缝的选择原则:
方法一:测量其半峰宽,然后狭缝宽度为半峰宽的1/10
方法二:不断减小狭缝,直至吸光度不再增大且谱图噪音满足要求。
对于溶液的定量测试,一般狭缝选择2nm就可以了,对于光学测试,比如使用积分球一般选择5nm,对于需要测定波长范围覆盖近红外区(800以上),一般选12nm。如果噪音仍然偏大可以适当加大狭缝。

U3/Q6. 紫外仪器可以测定多稀的稀溶液?

U3/A6. 因为每种物质具有其各自不同的吸收系数,所以不能用mg/l和mol/ml等单位来回答。将使用吸收值(Abs.)表示,一般情况下,UV 的噪声水平(数值的漂移)在0.002Abs.左右。因为定量下限(可以 测定浓度为多少的稀溶液的限定浓度)可以说是噪声水平的10倍,所以UV的定量下限约0.02Abs.左右。因此,吸光度值在0.02Abs 以下时,可以说在定量测定上浓度过稀。此时,使用 长光程池子,提高吸收值后再测定(100mm/50mm/20mm 等)。

U3/Q5. 如何使用UV更好的测定浓度高的溶液?

U3/A5. 对于一般的紫外仪器,当吸光度超过1ABS时,易出现测定误差。如果浓度再高则需要稀释或使用短光程池使吸收值降低后再测定,也可以使用杂散光更低的仪器进行测量。

U3/Q4. 为什么测高浓度时,误差会变大?

U3/A4. 根据朗伯比尔定律:A=K×B×C,其中K是摩尔吸收系数,B是光程长,这两者都是常数,所以吸光度跟浓度成正比,但当样品浓度变大时,吸收质点间隔变小—质点间相互作用—对特定辐射的吸收能力发生变化---K 变化,所以会产生误差。

U3/Q3. 什么是积分球,在什么情况下使用积分球?

U3/A3. 光通过固体样品时,因产生折射而使光束改变方向,因此,光路未放置样品时(100%光)与样品透射率测定时,入射检测器的光束形状是不同的。若样品带有类似透镜的曲面时,两者之间的差异更大,下图a是直接受光的情况,测定光超出检测器的受光面,多数场合出现透射率大幅度降低。与此相反,根据样品的光折射,有时测定光集中于受光面灵敏度高的部分,透射率的测定结果比预期的要好。为避免这样的误差,需要有一个根据光束形状的变化能将透过样品的全部光能量均一补足的受光部。欲达到此目的,图b中的积分球是最合适的方式。 这种方式光束只要由入射窗进入球内,那么在球内的白色扩散面就均一反射,然后通过球的小孔使光进入检测器。积分球唯一的缺点使球内产生扩散反射,光能量损失较大,使灵敏度降低。

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