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提高药物组分纯化工作的效率、缩短纯化时间、干燥时间、降低溶媒成本

HPLC制备在制药领域中被用于各种目的,例如合成化合物的纯化,杂质结构分析所需的纯化等。另一方面,大量粗样品的纯化和回收液的干燥需要大量时间。此外,使用HPLC制备进行纯化会使用大量溶剂,因此购买和废弃溶剂所需的费用成为实验必须考虑的因素。本文介绍了使用超临界流体色谱制备仪“Nexera UC Prep”,通过HPLC制备提升纯化工作流程效率的案例。

对蛋白质进行连续纯化和评估

尺寸排阻色谱法(SEC)是确认蛋白质的分子量及其分布的分析方法之一。在SEC中,体积较小的分子进入色谱柱填充剂的细孔内而绕远流出,而体积较大的分子则不会进入细孔内,直接流过,因此,会按照分子体积从大到小的顺序洗脱出来。因而即使蛋白质不同,而溶剂化体积大小相同的分子的洗脱体积相同,即在同一色谱条件下的保留时间相同。分析血液或细胞培养上清液中的目标蛋白质时,需在SEC分析之前进行蛋白质的纯化。本文介绍了纯化目标蛋白质后,通过SEC分获得组分的分离,再用液体处理器进行无缝收集馏分的方法。

使用HPLC-荧光检测器进行氨基酸自动柱前在线衍生的定量方法

在食品、制药开发等的各种领域都需要分析氨基酸。因此,分析氨基酸时采用HPLC-荧光检测器、HPLC-UV检测器、LC/MS、GC/MS等各种方法,各具特色。在本文中,介绍了使用HPLC-荧光检测器进行氨基酸自动柱前在线衍生的定量方法。本文介绍将使用该条件的分析方法适用于定量氨基酸的案例。

快速分析漱口水中的有效组分CPC及GK2

市售的口腔护理产品中含有多种有效组分,通常使用HPLC对其进行分析。其中,通过C18色谱柱分析四级铵盐的西吡氯铵(CPC)时,残留在硅胶填充剂表面的硅烷醇基(残留硅烷醇基)与CPC相互作用,产生吸附或谱峰的拖尾。近年来,采用掩盖残留硅烷醇基的色谱柱封端技术已经面世,但不同目标组分的抑制效果较差,仍会产生谱峰拖尾。此时,通过向酸性流动相中添加离子对试剂或过氯酸盐可抑制组分的吸附。而Shim-pack ArataTM C18则不必添加离子对试剂等,即可抑制与残留硅烷醇基的相互作用,获得良好的谱峰形状。本文将介绍快速同时分析漱口水中有效组分的CPC及甘草酸二钾(GK2)的案例。

依据ASTM D4327-03分析废水中的阴离子

离子色谱仪被广泛应用于检测或定量水溶液中的离子组分。在美国ASTM国际发行的ASTM D4327-031)中规定了利用抑制型离子色谱仪分析饮用水或废水中7种阴离子的检测方法。本文介绍了依据ASTM D4327-03,利用抑制型离子色谱仪HIC-ESP分析工业废水中阴离子的案例。(饮用水中的阴离子分析案例在01-00102-JP中进行了介绍。)由于工业废水中含有大量杂质,因此色谱柱采用高分离型的Shim-packIC-SA3。

使用一体型HPLC系统的自动预处理功能分析食品中的氨基酸

食品中包含多种氨基酸,例如以美味组分而为人所知的谷氨酸。测定各种氨基酸的含量不仅是对评估营养价值和味觉有用,对于功能性组分的研究也起到了作用。在应用报告L529B中,介绍了采用一体型HPLC的自动预处理功能分析氨基酸的情况。本文中使用该分析方法,对14种食品中的氨基酸进行了分析。同时介绍了预处理方案。

啤酒花中α酸和β酸的快速分析

啤酒原料中的啤酒花含有α酸(律草酮类)、β酸(蛇麻酮类)。α酸在酿造工序中经异构化,转化为异α酸(异律草酮类),是啤酒中的苦味组分。据报道,β酸虽然与啤酒的苦味程度关系不大,但会影响苦味的平衡。异α酸在啤酒以外的应用也备受关注,因为其具有预防阿尔茨海默病和改善认知功能退化的效果。 α酸及β酸通常采用HPLC进行分析,分析时间常为30分钟左右。本文参考EBC(欧洲啤酒酿造协会)7.7及ASBC(美国酿造化学家协会)Hops-14,介绍了一种通过高效液相色谱仪Nexera XR快速同时分析啤酒花中α酸和β酸的应用案例。此外,还介绍了在啤酒花提取液中添加异α酸进行同时分析的案例。

同时分析TEMPO氧化纤维素纳米纤维的成分糖和葡萄糖醛酸

纤维素纳米纤维(CNF)通过机械处理木质纸浆(纤维直径20–30 μm、纤维长度0.5–3 mm)获得。但是,木质纸浆中的CNF与CNF之间形成氢键,因此,在结晶最小尺寸(纤维直径3-4 nm)时,仅通过机械处理可能导致纳米化无法充分达到,或对CNF的损伤变大,需要更大能量进行纳米化,这些都是存在的问题。 据报告,东京大学矶贝明主任教授等组成的团队利用TEMPO ( 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基)实现了纤维素的纳米纤维化,正在进行量产。应用新闻01- 00023-JP曾向您介绍了利用Nexera™还原糖分析系统分析各种CNF成分糖的案例,本文将向您介绍同时分析TEMPO氧化CNF的成分糖和利用TEMPO催化生成的葡萄糖醛酸的案例。

提高小分子药物分析方法的开发效率

为了更高效地开发HPLC的分析方法,实施方法条件考察时,首先筛查对保留和分离影响较大的参数-色谱柱(固定相)和流动相的种类。但是,在此过程中,为了从为数众多的流动相(缓冲液pH、盐浓度、有机溶剂比例等)和色谱柱(ODS、C8、Phenyl等)中找出适合的方法,实际上需要以各种不同的条件进行分析。更换色谱柱和配制不同的流动相等工作需要耗费大量的精力和时间。为实现方法开发过程的自动化,岛津开发了“Nexera™方法开发系统”和专用软件“Method Scouting Solution”,本文介绍了如何使用该系统来快速考察并确定多种小分子药物同时分析的方法条件。

液相色谱法测定化妆品中3-亚苄基樟脑等22种防晒剂的含量

本文参照国家药品监督管理局2019年第40号通告附件内容《化妆品中3-亚苄基樟脑等22种防晒剂的检测方法》,对化妆品中22种防晒剂成分进行HPLC分析测定。实验结果表明,在标准规定范围内线性关系良好,且相关系数r均大于0.99。精密度实验中,22种防晒剂成分的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.09%~0.51%和0.97%~4.18%之间。对实际样品进行1.0 mg/g、5.0 mg/g、10.0 mg/g的混合标样添加测试,22种防晒剂成分的回收率分布在85.06%~113.30%之间。对仪器灵敏度的考察,22种防晒剂物质的LOD在0.03~0.15 μg/mL(0.003%~0.015%),LOQ在0.10~0.48 μg/mL(0.010% ~0.048%),满足《化妆品安全技术规范》中对22种防晒剂成分的检测要求。

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