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共5655条目前,在制药领域,生物药得到越来越多的关注。生物药是利用DNA重组、细胞融合、细胞培养等生物技术开发出的蛋白质药物、抗体药物等。几乎所有蛋白质合成都起始于N-末端,其序列组成对于蛋白质整体的生物学功能有着重要的影响力,因此蛋白质的序列分析对于生物药效果非常关键。目前,2015版《中国药典》三部人用重组DNA技术产品总论对生物药的生产及质量控制方面,针对其蛋白质结构提出技术要求,应测定目标产品的氨基酸序列,并与其基因序列推断的理论氨基酸序列进行比较。因此,N-末端氨基酸序列分析是很多已上市生物药的年检项目,如重组人促红素注射液(CHO细胞)、重组人粒细胞刺激因子注射液等。此外,国际法规中也有对于生物药N-末端氨基酸序列测定的要求。药品注册的国际协调组织颁布的指导法规ICH-Q6B规定,生物药进行申报时,必须提供N-末端氨基酸序列信息。《欧洲药典》中规定,生物仿制药申报也必须提供N-末端序列。
2019年2月15日
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当前,元素形态分析的重要意义已经日益受到分析工作者和健康民众的共同关注。元素的不同形态具有不同的物理化学性质和生物活性。例如无机砷的毒性很大,有机砷的毒性较小或者基本没有毒性,形态分析已成为分析科学领域的一个重要分支。HPLC是一种具有高效的分离技术,把HPLC与具有极低的检测限、宽的动态线性范围、分析精密度高、速度快和可测定多元素等优点的ICP-MS联用,可用于研究食品、环境、中草药、海洋类动植物、玩具、人类生物样品中As、Hg和Cr等元素的形态分析。目前,形态分析已成为分析科学领域的一个重要分支。
2019年2月15日
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本文参考国标《生态纺织品技术要求》(GB/T 18885-2009),使用人造酸性汗液对皮革及纺织品进行萃取,使用岛津ICPMS-2030电感耦合等离子体质谱仪测定纺织品及皮革中可萃取的As、Cd、Co、Cr、Cu、Ni、Pb、Sb和Hg等9种重金属元素含量的方法。该方法灵敏度高、定量准确、精密度好,可满足皮革及纺织品中可萃取重金属元素分析的需求。
2019年2月12日
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N端焦谷氨酸环化封闭类单克隆抗体药物因N端缺乏自由的α氨基,不能通过Edman降解法直接进行N端测序。本文以帕尼单抗为例,加入焦谷氨酸氨肽酶切除环化的焦谷氨酸后,测定重链N端前15个氨基酸序列,与理论信息一致,表明对N端焦谷氨酸环化封闭类样品进行去焦谷氨酸环化处理后,应用PPSQ-53A可以测定N端氨基酸序列。
2019年2月12日
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生物体在合成蛋白质时,N端首位的甲硫氨酸在蛋白质加工过程中可能被酶切除。本文应用蛋白质测序仪PPSQ-53A测定了发生N-末端部分甲硫氨酸切除的蛋白质类药物重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子的N端前16个氨基酸的序列,结果与理论序列一致。除了氨基酸定性,根据信号峰强度,可以粗略估计样品N端甲硫氨酸的缺失比例。以上表明应用PPSQ-53A可以测定N-末端部分甲硫氨酸缺失的蛋白质的N端氨基酸序列。
2019年2月12日
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本文对基因工程药物重组人粒细胞刺激因子原液除盐后,应用蛋白质测序仪PPSQ-53A测定N端前16个氨基酸的序列,结果与理论序列一致,验证了此方法的准确性,展示了重组人粒细胞刺激因子的分析结果。
2019年2月12日
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本文通过SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)对融合蛋白质类药物重组人血管内皮生长因子受体-抗体融合蛋白进行分离后,电转印至PVDF膜(聚偏氟乙烯膜)上,剪切目标条带,应用蛋白质测序仪PPSQ-53A测定N端前15个氨基酸的序列,结果与理论序列一致,验证了此方法的准确性,展示了重组人血管内皮生长因子受体-抗体融合蛋白的分析结果。
2019年2月12日
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本文应用岛津基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF)检测疫苗蛋白组分,检测各亚基的分子量信息、分布与比例。结果显示标准品具有完整亚基组成,疫苗样品也具有较好的亚基完整性。该结果与疫苗样品的活性结果匹配。本例表明此方法无需样品前处理、快速简便、可靠性强,可为疫苗亚基组成分析提供有力参考。
2019年2月12日
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本文应用岛津台式基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪MALDI-8020,在线性正离子模式下,以CHCA(α-氰基-4-羟基肉桂酸)为基质,分析花生过敏原蛋白质Ara h 2的酶解产物,得到了精确的分子量分布信息。将酶解产物的PMF(肽指纹图谱)检索Mascot数据库,成功匹配到理论蛋白质信息。
2019年2月12日
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