sys_admin 在 星期二, 08/29/2017 - 21:59 提交
目前食用油掺假掺杂现象屡见不鲜,这不仅影响着消费者的健康,更影响消费信心,严重侵害了消费者的利益。本文利用DNA的分子生物学手段,基于不同物种具有不同的DNA序列,针对待鉴定物种的特异性基因设计PCR引物,利用MultiNA检测PCR扩增产物的存在及链长,建立了基于MultiNA鉴定食用油品种的方法。将玉米油中提取的特异性基因PCR扩增,MultiNA检测其扩增后产物大小为196 bp,与玉米基因PCR目标产物的大小190 bp基本一致。实验结果表明本方法可以实现对食用油的定性检测。
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本文利用MultiNA微芯片电泳对12个经过不同引物相同PCR反应和限制性内切酶酶切后可能含某DNA外显子片段的样品进行定性与定量,发现第10-12个样品在104 bp,101 bp和102 bp处各有1个浓度较高的片段,推断应该为同一片段,并且是目标外显子,尺寸约为102 bp,浓度分别为1.73 ng/μL,2.16 ng/μL,和1.37 ng/μL。
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本文利用MultiNA微芯片电泳对RFLP片段进行了多次定性与定量分析,并计算了重现性。样品主要片段尺寸约为304 bp,浓度约为6.2 ng/μL,另外,就准确度而言尺寸方面,±3 bp;浓度方面,±30%。就重现性尺寸方面,0.65%;浓度方面,14.81%。实验证明MultiNA微芯片电泳完全可以对微量RFLP片段进行定性与定量分析,可广泛应用于基因突变研究。
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糖类物质极性高、难挥发、热不稳定,其中寡糖和多糖还具有相对分子质量分布发散的性质,其质谱表征比较困难。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)灵敏、快速,对杂质的包容性强、分析的质量范围大,能够对糖类尤其是非衍生化糖进行直接分析。本文应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱以DHB(2,5-二羟基苯甲酸)为基质,对未衍生化的寡糖进行了分析,直接给出了寡糖样品分子量的分布、重复单元结构和离子峰的结构信息。
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本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8045联用,连续30天测定血浆中维生素A和维生素E,分别考察了日内精密度和日间精密度。实验数据表明,在没有使用阀切换情况下,30天内维生素A和维生素E的平均RR值稳定,相对偏差小于10%,能够为临床诊断提供参考。
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本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8045联用测定鸡肉中12种喹诺酮类抗生素的方法。该方法在9 min内完成12种抗生素的分析,校准曲线的相关系数均在0.997以上。对不同浓度抗生素的混合标准溶液各平行测试6次,12种目标化合物的保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.03~0.27%和1.13~4.93%之间,仪器精密度良好。对于不同浓度下基质加标回收率范围在91.90~108.60%之间。该方法可应用于鸡肉中12种喹诺酮类抗生素残留的同时检测。
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本文使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用,建立了一种同时测定细胞培养上清液中95种化合物的方法。该方法在17 min内可完成95种化合物的分析,适用于细胞培养上清液中糖类、氨基酸类、核苷酸类、维生素类等化合物的快速检测,且重复性好、灵敏度高。利用该方法,我们考察了细胞株在4种不同培养基中的营养物和代谢物变化情况,并绘制出目标物的时间变化趋势图,对相关研究人员判断细胞状态、改进培养基组成具有一定参考意义。
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本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱和三重四极杆质谱联用技术LCMS-8060测定人血浆中的新型降糖药CX1001及其代谢物 CX1001-M1的方法。人血浆样品经二氯甲烷萃取后,可在5.5min内快速、准确地完成分析。本文考察了方法的线性、精密度与准确度、回收率和残留,结果表明 CX1001及其代谢物 CX1001-M1线性范围分别为0.1~180 ng/mL,0.1~90 ng/mL,相关系数大于0.999,准确度范围90.6%~109%,线性良好;不同浓度质控样品每批次连续进样6次,其精密度与准确度分别在2.11~7.54 %与96.9~113%之间;血浆加标样品0.3 ng/mL平行分析五次,CX1001及其代谢物 CX1001-M1回收率分别为97.7%和97.0%。
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本文建立了使用岛津超高效液相色谱三重四极杆质谱联用仪LCMS-8045测定自来水中21种药物和个人护理用品物质(PPCPs)残留的方法。参考EPA1694号办法对样品进行前处理,其中21种PPCPs化合物在0.05 μg/L~10 μg/L浓度范围内线性良好,校准曲线的判定系数在0.9954~0.9999之间,检出限为0.0025 μg/L~0.015 μg/L,定量限为0.0075 μg/L~0.045 μg/L。对1.0 μg/L和10.0 μg/L两不同浓度的标准工作液连续测定6次,保留时间相对标准偏差分别为0.13~0.53%和0.12~0.55%,峰面积的相对标准偏差分别为1.91~8.64%和0.83~4.31%之间,仪器精密度良好。21种PPCPs化合物在空白水样中的加标回收率在75.1%~99.7%之间。该方法以其分析速度快、重复性好、灵敏高的特点,可满足水中PPCPs的检测需要。
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EreximTM(Energy-resolved oxonium ion monitoring)是在三重四极串联质谱MRM分析模式下,对N-糖基化糖肽结构进行结构表征的一项技术,可用于预测糖链的结构差异。凭借EreximTM技术,本文通过岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8060联用,完成了贝伐珠单抗N-聚糖异质性的结构表征。实验中发现,贝伐珠单抗药物的N-糖基化糖肽中主要糖链为ID44100和33100,它们的结构与标准谱图中ID44100和33100a的结构相似。
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