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利用PPSQ-51A/53A梯度系统分析小鼠IgG的N末端氨基酸系列

随着基因组分析技术的发展,基因组数据库变得更加全面,作为利用这个数据库进行后基因组分析形式之一的蛋白质组分析也得到了长足发展。随着质谱技术的发展,我们能够通过质谱仪及其数据库实现蛋白质氨基酸测序的高通量分析。虽然在基因组数据库中许多蛋白质被注释为前体蛋白,但在细胞中表达的各种蛋白质是由这些前体蛋白加工为成熟蛋白并运输到体内的。因此,当使用质谱仪及数据库对成熟蛋白的氨基酸序列进行鉴定时,质量数可能与理论值不同,从而导致搜索结果的得分较低。而且,对于一些基因组数据库尚未完成的物种而言,使用质谱鉴定氨基酸序列可能比较棘手,所得序列结果也欠缺可信度。另一方面,利用传统的Edman降解法进行蛋白质测序,虽然耗费一定的时间,但所得氨基酸序列结果非常可靠,对于尚未建立数据库的样品的氨基酸序列分析非常有效。本文介绍了利用微量IgG蛋白(来自小鼠血清)进行氨基酸测序的方法。PPSQ-51A/53A梯度系统测序简便、可靠,是蛋白质分析不可缺少的工具。

利用MALDI-7090采集的实验鼠肝脏组织切片的MS成像分析

为了讨论疾病的原因及进展情况,在明确病变组织的基础上,搞清病变组织中存在的分子数量变化及分布。根据LC-MS或GC-MS进行的代谢分析可有效获得代谢产物及脂质定量变化,但由于分析方法的性质,无法知道什么分子在病变组织的什么位置。因此,很难看到病理发展中出现的分子分布变化。近年来,MS成像分析成为解决这一问题的方法。此次将要介绍的实验对象为患有非酒精性脂肪肝炎(NASH)实验鼠的肝脏,MS成像分析与LC-MS或GC-MS的数据组合起来解析疾病状态中的分子动态。

使用台式MALDI-TOF质谱仪鉴定动物毛发

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 具有简单、快速获取多肽、蛋白质、合成高分子等各种高分子样品的分子量信息的特点。在研究开发和质量控制领域,MALDI-TOF-MS 广泛应用于合成品和天然产物的分子量确认。作为MALDI 的新用途之一,大箸信一等人提出通过检测具有物种特异性的动物毛发中的肽来鉴别动物毛发的方法1)。作为“羊绒等动物毛发纤维中肽的检验方法”,该鉴别方法已得到国际标准化组织(ISO) 的认可,并在ISO 标准中做出定义2)。该鉴别方法还可以分析1 根毛发,不仅可以用于防止伪装羊毛,还可以应用于检查混入食品等中的异物。本文将为您介绍使用台式MALDI-TOF MS MALDI-8020 鉴别动物毛发的案例。

使用台式MALDI-TOF MS确认有机功能材料的合成

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)具有简单、快速获取从低分子到高分子各种样品的分子量信息的优点。MALDI-TOF质谱广泛应用于研究开发以及质量控制领域中合成材料和天然产物的分子量测定。与LC-MS等其他类型的质谱仪相比,MALDI-TOF MS可使用多种溶剂,在优化采集参数方面快捷简单,即使样品分子量较大,也主要检测单电荷的峰(一个组分=一个峰) 。由于这些优点,可简便、快速确认有机染料、有机发光二极管(OLED)材料、有机太阳能电池等有机功能材料的合成。下面介绍了使用台式MALDI-TOF MS测定各种有机功能材料的实例。

使用台式MALDI-TOF MS分析癌细胞外囊泡化疗耐药

作为与维也纳医科大学合作的一部分,该项目旨在使化疗患者更快、更少侵入性地检测化疗耐药生物标志物。快速检测化疗耐药将改善癌症治疗,从而提高癌症生存率。癌细胞通过细胞外囊泡(EVs)与全身细胞相互作用。细胞外囊泡在体内循环并传递引起恶性表型的分子信息。通过同时培养大肠癌转移淋巴节细胞和5-氟尿嘧啶,我们建立了对化疗耐药性增强的细胞。将通过超速离心分离从该细胞的培养上清液中回收的细胞外囊泡,用作体液中循环的源于癌细胞的生物标志的模型。本文通过MALDI-TOF-MS测定了细胞外囊泡中蛋白质的差异表达,这是由于其母细胞的化疗耐药性增加的结果 。

依据ASTM D7011使用Nexis SCD-2030分析苯中微量噻吩

噻吩等硫成分在会使催化剂中毒,同时燃烧时会产生二氧化硫污染大气,因此在石油质量管理控制中需要使用高灵敏度的检测器进行分析。作为使用气相色谱法的分析实例,在应用方法No. G291 中介绍了使用火焰光度检测器(FPD)进行的分析。ASTM D7011介绍了一种分析苯中痕量噻吩的方法,使用化学发光硫检测器(SCD)作为气相色谱检测器,检出限约为0.03 mg / kg,比GC-FPD方法低。新型硫化学发光检测系统Nexis SCD-2030(图1)是具有一流灵敏度、稳定性、选择性地检测硫化合物种类的系统。本文中介绍了依据ASTM D7011使用Nexis SCD-2030分析苯中噻吩的高灵敏度分析实例。

紫外线降解ABS树脂表面分析

XPS(X射线光电子能谱法:X-ray Photoelectron Spectroscopy)作为一种表面分析方法,除了对材料表面上约10 nm处存在的元素进行定性和定量分析外,还可以分析样品表面元素化学结合的状态。ABS树脂(由丙烯腈、丁二烯、苯乙烯构成的树脂)被广泛用于家电产品和汽车零部件、日用品等各种常见的产品。众所周知,长时间暴露在日光(紫外线:UV)下会导致表面降解,因此解析其机制是非常有必要的。本文中介绍了使用XPS技术对被UV照射不同时间的ABS树脂样品进行表征测试,评价UV照射时间与化学结合状态之间关系的实例。

阴离子表面活性剂的高速分析

在定量分析自来水中的阴离子表面活性剂时,根据含碳原子数不同,将含碳数C10~C14混合标准液所获得的约20个色谱峰进行分类,利用每类含碳数相同的色谱峰面积和进行定量。用于阴离子表面活性剂分离的色谱柱可分为(1)识别不同含碳数的分型检测多个谱峰的色谱柱;(2)无法识别不同碳数的分型、作为单个谱峰检测的色谱柱。根据厚生省水质标准1),采用固相萃取-高效液相色谱法检测阴离子表面活性剂,5类碳链组的标准值为0.2 mg/L。该方法中,分离色谱柱被指定为“内径4.6mm、长度15~25cm的反相C18、粒径为3~5μm的色谱柱或与其具有同等及以上分离性能的色谱柱” 2)。该标准中规定的色谱柱与上述(1)的色谱柱相同。应用新闻No. L477B中采用了Shim-pack™ VPODS 色谱柱(内径4.6 mm、长度25 cm、粒径5 μm),而本文介绍采用Shim-pack FC-ODS 色谱柱(内径4.6 mm、长度15 cm、粒径3 μm)的实例。另外,还介绍采用快速分离色谱柱Shim-pack XR-ODS II(内径3.0 mm、长度10 cm、粒径2.2 μm)的高速分析实例。

鱼肉中核酸相关物质分析和利用多数据报告自动计时鲜度(K值)

众所周知,鱼贝类的肌肉与畜产动物相比,组织较为柔软、水分较多,因此容易变质。正确判定这些鱼贝类的鲜度,在食品安全方面非常重要。一般来说,消费者通过鱼眼的颜色和鱼体的紧实程度等外观判断鲜度,而将动物肌肉中能量源ATP(三磷酸腺苷)的变化作为判断肌肉鲜度指标的方法也被广泛应用。通过数值评价鱼贝类鲜度时,常使用K值。近年来,有报道组胺过敏导致的食物中毒。当红鱼例如金枪鱼腐烂时,鱼肉中续集高浓度组胺(组氨酸代谢物)。尽管可以通过HPLC方法检测组胺,但前处理方法复杂(衍生化),需要一套庞大的自动化前处理系统。因此,通过简单配置的NexeraTM LC系统检测与腐烂程度相关的ATP类物质是非常实用的。本文使用HPLC测定新鲜金枪鱼及解冻金枪鱼的K值。另外,展示了各金枪鱼鲜度随时间变化的多数据报告的实例。

利用Nexera GPC系统提高分析通量:重叠进样与同时分析多种聚合物添加剂

高分子分子量分布的测定是在体积排除模式下进行的HPLC分析中的一个领域,一直以来被称为GPC (gel permeation chromatography) 。近来提高已建立的GPC分析方法的分析通量受到越来越多关注。在本文中,我们将介绍一种全新的GPC分析模式,采用重叠进样和聚合物添加剂的同时定量测定,提高分析效率。

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