sys_admin 在 星期二, 08/29/2017 - 21:59 提交
为验证深加工食品中华鳖蛋白粉中是否可以用DNA分子标记鉴定,利用改动的试剂盒方法对市售中华鳖蛋白粉进行DNA提取,并用细胞色素b(Cyt b)通用引物进行PCR扩增,微芯片电泳MultiNA检测扩增产物。实验结果表明深加工蛋白粉中可以得到质量较高的DNA,与从中华鳖肌肉样品中得到的阳性对照DNA相比,结果相似,得到约450 bp的产物。本方法为分子标记技术应用于高附加值食品的鉴定提供了技术支持。
sys_admin 在 星期二, 08/29/2017 - 21:59 提交
利用植物基因组提取试剂盒提取转基因大豆标准品的基因组,以大豆内源Lectin基因作为内参,针对356043转基因序列设计特异性引物进行PCR扩增,MultiNA检测扩增产物大小,结果显示PCR扩增产物片段长度与理论长度基本一致,表明检测出转基因356043成分。本实验表明应用MultiNA可以实现对转基因大豆356043品系的鉴定。
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利用植物基因组提取试剂盒提取转基因玉米Bt-11标准品的基因组,以玉米内源Zein基因作为内参,针对Bt-11转基因序列设计特异性引物进行PCR扩增,岛津MultiNA微芯片电泳仪检测扩增产物,结果显示扩增产物片段长度与理论长度基本一致,表明含有转基因Bt-11。本实验表明应用MultiNA可以实现对转基因玉米中Bt-11的定性检测。
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利用植物基因组提取试剂盒提取转基因玉米Bt-176标准品的基因组,以玉米内源Zein基因作为内参,针对Bt-176转基因序列设计特异性引物进行PCR扩增,MultiNA微芯片电泳仪检测扩增产物,结果显示扩增产物片段长度与理论长度基本一致,表明含有转基因Bt-176。本实验表明应用MultiNA可以实现对转基因玉米中Bt-176转基因成分的定性检测。
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本文利用岛津Ampdirect_x0015_Plus试剂盒对鸡肉,牛肉,羊肉,猪肉进行处理,无需精制DNA,便可进行快速简便的PCR过程,使用岛津MultiNA检测PCR产物,结果显示不仅纯肉可以被鉴定,混合肉也可以实现定性检测。本实验表明应用MultiNA可以鉴定不同肉类的品种。
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利用植物基因组提取试剂盒提取大豆、玉米各三组样品的基因组,分别以大豆内源Lectin和玉米内源Zein基因作为内参,针对转基因作物中常用的外源启动子CaMV35S和外源终止子NOS基因设计特异性引物进行PCR扩增,MultiNA检测扩增后产物判断是否存在转基因成分。结果显示三组大豆样品未检出转基因成分,而两组玉米样品检测出NOS外源基因,显示市场上可能存在未经标识的转基因玉米。本实验表明应用MultiNA可以实现转基因作物的筛选定性检测。
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截至到目前我国尚没有一条法规对调和油市场进行规范,在此情况下,一些企业受利益驱使,不断挑战诚信底线,利用标准漏洞,以次充好,导致食用油市场乱象丛生,价格虚高,严重伤害了消费者权益。本文利用分子生物学手段,针对食用调和油中大豆油和菜籽油的成分分别设计引物,进行多重PCR同时特异性扩增此两种基因,应用MultiNA检测PCR产物,结果显示两种基因片段(大豆163 bp,菜籽126 bp)被同时检测出,与理论片段(大豆162 bp,菜籽121 bp)大小基本一致。实验结果表明本方法可以对调和油中多种成分进行同时定性检测。
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目前食用油掺假掺杂现象屡见不鲜,这不仅影响着消费者的健康,更影响消费信心,严重侵害了消费者的利益。本文利用DNA的分子生物学手段,基于不同物种具有不同的DNA序列,针对待鉴定物种的特异性基因设计PCR引物,利用MultiNA检测PCR扩增产物的存在及链长,建立了基于MultiNA鉴定食用油品种的方法。将玉米油中提取的特异性基因PCR扩增,MultiNA检测其扩增后产物大小为196 bp,与玉米基因PCR目标产物的大小190 bp基本一致。实验结果表明本方法可以实现对食用油的定性检测。
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本文利用MultiNA微芯片电泳对12个经过不同引物相同PCR反应和限制性内切酶酶切后可能含某DNA外显子片段的样品进行定性与定量,发现第10-12个样品在104 bp,101 bp和102 bp处各有1个浓度较高的片段,推断应该为同一片段,并且是目标外显子,尺寸约为102 bp,浓度分别为1.73 ng/μL,2.16 ng/μL,和1.37 ng/μL。
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本文利用MultiNA微芯片电泳对RFLP片段进行了多次定性与定量分析,并计算了重现性。样品主要片段尺寸约为304 bp,浓度约为6.2 ng/μL,另外,就准确度而言尺寸方面,±3 bp;浓度方面,±30%。就重现性尺寸方面,0.65%;浓度方面,14.81%。实验证明MultiNA微芯片电泳完全可以对微量RFLP片段进行定性与定量分析,可广泛应用于基因突变研究。
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